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(3)主要仪器
原子吸收分光光度计。植物
(4)试剂
①Ca标准溶液[(p(Ca)=1000mg·L-1)〕:称取2.497gCaCO3(分析纯,钙镁在110oC烘4h)溶于少量盐酸溶液〔c(HCl)=1mol·L-1〕中,全量煮沸赶去CO2,测定用水洗入1000mL容量瓶中后定容。植物或直接购买Ca标准液。钙镁
②)Mg标准液[ (p(Mg)=1000mg·L-1)]:1.0000g金属镁(分析纯)溶于少量盐酸溶液[c(HCl)=6 mol·L-1〕中用水洗入1000 mL容量瓶中后定容。全量或直接购买Mg标准液。测定
③镧溶液[(La)=50g·L-1]:称13.40g LaCL3·7H2Og溶于100mL水中。植物
(5)操作步骤
吸取27.3.1.1或27.3.1.2的钙镁待测液2.00mL~5.00mL(含Ca 0.1 mg~0.5mg, Mg 0.01 mg~0.05mg)于50mL容量瓶中,加入镧溶液[试剂(3)]1mL以控制硅、全量铝或磷酸盐的测定干扰,用水定容后即可用原子吸收分光光度计测定Ca和Mg。植物在相同仪器和溶液组成及酸度条件下,钙镁测定Ca和Mg标准溶液并绘制工作曲线,全量从而查出待测液中Ca和Mg的浓度(有些型号仪器测定Ca和Mg标准溶液后什算机自动绘图,测定待侧液时计算机直接读出或打印出待测液中Ca和Mg的浓度)。再根据分取倍数和称样量计算植物样品中Ca和Mg的含量。
标准工作曲线的况制:首先把1000mg·L-1 Ca标准液稀释10倍,把1000mg·L-1Mg标准液稀释100倍,然后吸取100mg·L-1Ca标准液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL和10mg·L-1 Mg标准液0mL, 1mL,2 mL,3mL, 4mL, 5mL,将上述相同体积的Ca和Mg标准溶液置于同一个50mL容量瓶中,配成Ca-Mg混合标准系列溶液,加HCI溶液,使最后混合标准溶液组成及酸度与待测液相同,再加钥溶液[试剂(3)]1 ml.,用水定容,即得到0mg·L-1、 2mg·L-1、4mg·L-1、6mg·L-1、8mg·L-1、10Mg·L-1 Ca和0mg·L-10.2 mg·L-1、0.4mg·L-1、0.6mg·L-1、0.8mg·L-1、1.0mg·L-1、Mg混合标准系列溶液。也可根据待测液浓度在Ca和Mg的检测限范围内对标准工作曲线做适当调整。
(6)结果计算
式中: ω(Ca)或ω(Mg)——烘干植物样品中全钙(镁)的质量分数,%;
P——原子吸收光潜议读出的待测液中钙(镁)的质量浓度,mg·L-1;
ts——分取倍数。
V——测定时待测液体积,mL;
m——烘干样品质量,g。
4、EDTA络合滴定法
(1)方法原理
在pH>12的溶液中,Mg2+即沉淀为Mg(OH)2,故可用EDTA标准液直接滴定Ca2+,以酸性铬蓝K和萘酚绿B混合指示剂(简称K-B指示剂)或钙红为指示剂,终点由葡萄酒红色突变为纯蓝色。由EDTA标准液计算Ca2+的量。
在pH10的溶液中,可用EDTA滴定Ca2++ Mg2+合量,以K-B指示剂或铬黑T为指示剂,终点也是由葡萄酒红色变为蓝色。由Ca2++Mg 2+合量中减去Ca2+量,即为Mg2+量。以上为EDTA直接滴定法。对于含碗较高的植物样品(如种子),则须采用EDTA返滴定法,即加入过量的EDTA标准溶液,然后再用Ca标准溶液返滴定过剩的EDTA。以免在碱性溶液中生成磷酸钙而造成的误差。
(2)主要仪器
150mL三角瓶;滴定管等。
(3)试剂
①EDTA标准液[c(C10H14O8N2Na2·H2O)=0.01mol·L-1]。
②钙红指示剂:0.5g钙红指示剂[2-羟基-1-(2-羟基-4磺酸-1-萘偶氮基)-3-蔡甲酸,C21H14O7N2S〕与50g NaCl研细混匀,贮于棕色瓶中。
③NaOH溶液[c(NaOH)=2 mol·L-1]:8.0g NaOH(分析纯)溶于100mL无CO2水中。
④K-B指示剂:0.5g酸性铬蓝K和1g蔡酚绿B,与100g105℃烘过的NaCl(分析纯)一同研细磨匀,贮于棕色瓶中。
⑤铬黑T指示剂:0.5g铬黑T与100g烘干的NaCl(分析纯)共研至极细,贮于棕色瓶中。
⑥稀HCl[c(HCI)=1.2 mol·L-1],100mL浓HCl(分析纯,P=1.19g·mL-1)用水稀释至1L。
⑦氛缓冲溶液(pH=10):67.5g NH4Cl(分析纯)溶于无CO2水中,加入浓氨水(分析纯,P=O.9g·mL-1,含NH3 25%)570mL,用水稀释至1L,贮于塑料瓶中,并注意防止吸收空气中的CO2 。
也可用下列无臭而又稳定的氮缓冲溶液:55mL浓HC1与400mL水混合后,边搅边加入310 mL2-氮基乙醇NH2CH2CH2OH,用水稀释至1L。
⑧Ca标准液[c(Ca)=0.01mol·L-1]:准确称取在105℃下烘4小时~6小时的Ca-CO3(分析纯)0.5004g。溶于25mL盐酸溶液[c(HCI)=0.5mol·L-1]中煮沸除去CO2。用无CO2蒸馏水洗入500mL容量瓶并稀释到刻度。
⑨三乙醇胺溶液[C6H15NO3(1:5)]:三乙醇胺与蒸馏水按1:5体积比混合。
(4)操作步骤
(1)EDTA直接滴定法(适用于一般茎叶样品)
Ca的测定:吸取27.3.1.1或27.3.1.2待测液10.00mL(含Calmg~5mg)于150mL三角瓶中,用水稀释至约50mL,加入1:5三乙醇胺溶液5mL,摇匀后放置2 min~3min,然后加入氢氧化钠溶液[试剂(3)]4mL,摇匀,放置1min~2min,加入钙红或K-B指示剂0.1g,用0.01mol·L-1EDTA标准液滴定至紫红色突变为纯蓝色为终点,记录所耗EDTA液的mL数为V2。
参考资料:土壤农业化学分析方法
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